磷脂酶A2在内*素致中性粒细胞肺内聚集及损伤中的作用
磷脂酶A2在内*素致中性粒细胞肺内聚集及损伤中的作用
磷脂酶A2在内*素致中性粒细胞肺内聚集及损伤中的作用
中华结核和呼吸感染 1998年第7期第21卷 论著摘要
作者：刘松 殷凯生 朱荣 刘立 杨玉
单位：221009 徐州，江苏省徐州市第四人民医院呼吸科(刘松，刘立)；南京医科大学第一附属医院呼吸科(殷凯生，杨玉)，病理科(朱荣)
内*素造成的急性肺损伤（ALI）主要由中性粒细胞（PMN）肺内聚集与活化所致［1］。我们研究的目的是探讨急性肺损伤时，磷脂酶A2(PLA2)在PMN肺内聚集和活化以及所造成损伤中的作用。
材料与方法 体重160～245 g健康SD大鼠36只，随机分空白对照组(Ⅰ组)、内*素组(Ⅱ组)、内*素＋氯喹组(Ⅲ组)和氯喹组(Ⅳ组)共四组（每组9只）。20%乌拉坦麻醉后腹腔内注射二磷酸氯喹（Sigma产品）100 -1(Ⅲ、Ⅳ组)或等量生理盐水(Ⅰ、Ⅱ组)；20分钟后，股静脉缓慢注射大肠杆菌内*素li O111b4(Sigma产品)2 -1(Ⅱ、Ⅲ组)或等量生理盐水(Ⅰ、Ⅳ组)。均观察4小时，放血处死动物，准确称量肺湿重，计算肺系数（肺系数＝肺湿重×100/体重）。左肺行支气管肺泡灌洗，共计4 ml，回收支气管肺泡灌洗液（BALF）3.2～3.6ml，立即2000 r/min，离心15分钟。上清液－20℃保存，Lowry法测蛋白浓度，化学比色法测丙二醛（MDA）浓度。右肺上叶常规切片送病理检验，HE染色，格目镜计数任意15个高倍视野(HP)下PMN的细胞数。右肺其余三叶匀浆后以酸式滴定法测PLA2活性。
统计处理采用多组资料单因素方差分析、q检验和直线相关分析。
结果 1.Ⅱ组动物注射内*素后呼吸急促，并进行性加重，约2小时后渐缓解。Ⅲ组与之类似，程度较轻，持续时间短。Ⅰ、Ⅳ组在实验过程中基本平稳。各组动物无死亡。
2.各组动物PLA2活性变化及PMN在肺内聚集见附表。肺内PMN计数与肺组织PLA2活性之间呈显著正相关（r=0.64，P＜0.01）。
3.内*素可引起肺损伤，表现为肺系数增高，BALF中蛋白渗出增多及脂质过氧化产物MDA增高(附表)。
应用PLA2抑制剂后，各损伤指标有不同程度下降。PMN肺内聚集与肺系数、BALF中蛋白和MDA浓度等损伤指标呈显著正相关，r分别为0.76、0.67、0.65，P均＜0.01。
讨论 PLA2是一种磷脂水解酶，参与机体的炎症和细胞损伤，在内*素性肺损伤中起着重要的作用［2］。氯喹可与PLA2非特异性结合而抑制其活性。内*素能使体内单核、巨噬细胞及PMN等产生和大量激活PLA2。活化的PLA2水解膜磷脂，改变膜磷脂的构成成份，使PMN膜刚性增加，易滞留于肺循环；同时启动的炎性介质可促进PMN及血管内皮细胞表面粘附分子的表达，导致中性粒细胞活化、渗出，损伤肺泡毛细血管膜。目前认为，影响PMN肺内聚集的因素很多。本组研究PLA2的活性被完全抑制后，PMN肺内聚集程度仍大于正常对照组，因此，有关PMN肺内聚集的影响因素及分子基础尚有待于进一步探讨。
参考文献
1 Brigham KL,Meyrick dotoxin and lung injury. Am Rev Respir Dis,1986,133:.
2 刘松．磷脂酶A2与内*素性肺损伤．国外医学呼吸系统分册，1997，17：．
(收稿： 修回：)
附表 注射内*素后各组动物PLA2活性、PMN计数、肺系数及BALF中蛋白和MDA变化(±s)
组别
动物数(只)
PLA2的活性(U)
PMN计数*
肺系数
蛋白(mg/ml)
MDA(nmol/ml)
Ⅰ组
9
94±34
42±23
0.56±0.06
0.296±0.08
3.9±1.0
Ⅱ组
9
294±49▲
475±128▲
1.00±0.20▲
1.093±0.184△
9.1±1.2▲
Ⅲ组
9
115±47△
320±99▲
0.71±0.09**△
0.482±0.151**△
6.3±2.0▲△
Ⅳ组
9
88±30△
50±20△
0.55±0.07△
0.308±0.082△
3.9±0.9△
注：*为15HP中的细胞个数。与Ⅰ组相比**P＜0.05，与Ⅰ组相比▲P＜0.01，与Ⅱ组相比△P＜0.01
